简单来说，总Erk就是你细胞里原本就有的Erk蛋白总量，不管是激活态还是非激活态都算在内。而p-Erk特指那些已经被磷酸化修饰、从而处于激活状态的Erk分子。在做WB实验时，如果你只测p-Erk，可能只能看到信号通路有没有被激活，但无法判断不同样品之间总的Erk表达是不是有差异。所以通常建议同时检测总Erk和p-Erk，这样数据更有说服力，也能避免因为上样量不均导致的误判。特别是在研究药物或刺激因素对Erk通路的影响时，两者结合分析更为关键

总Erk和p-Erk的区别主要在于是否发生了磷酸化修饰。总Erk反映的是整个样品中Erk蛋白的表达水平，无论它有没有被激活；而p-Erk则特指已经被双重磷酸化（Tyr204和Thr202位点）的Erk蛋白，是功能活跃的形式。在进行WB实验设计时，通常会同时检测这两个指标，用p-Erk来评估信号通路的激活程度，再用总Erk作为内参来标准化数据，确保实验结果准确可靠。比如在比较不同处理组之间的差异时，这种双标方式能有效排除样品加载不均的问题

总Erk和p-Erk的主要区别在于它们代表了Erk蛋白的不同状态。总Erk指的是细胞内所有Erk蛋白的总量，不管它有没有被激活。而p-Erk指的是磷酸化的Erk蛋白，也就是处于激活状态的Erk。在做WB的时候，检测总Erk可以帮助你确认样品中Erk表达的总体水平是否一致，而检测p-Erk则是为了看这个信号通路有没有被激活。一般来说，为了更全面地了解Erk信号通路的状态，两个都需要检测，这样能排除上样误差，也能看到刺激处理后信号通路的变化情况

　　ERK1/2的结构特点及激活机制ERK1/2是由Boulton等[1,2]于90年代初期先后分离鉴定的一种蛋白激酶，相对分子量分别为44kD和42kD,它们有90%的相似性。
　　ERK1/2为脯氨酸导向的丝氨酸/苏氨酸激酶，可以使脯氨酸相邻的丝氨酸/苏氨酸磷酸化。
　　从细胞受到刺激至细胞出现相应的生物学效应，其间通过MAPK信号转导通路多级激酶的级联反应，其中包括3个关键的激酶，即MAPK,MAPKK和MAPKKK。
　　MAPKKK对MAPKK的丝氨酸、苏氨酸双位点磷酸化而将其活化；
　　进而使MAPKK对MAPK进行苏氨酸、丝氨酸双位点磷酸化[3]。
　　ERK1/2的活化是将信号从细胞膜表面受体转导至核的关键，这一转导过程有GTPase2Ras,Raf21,丝/苏氨酸激酶和MEK双特异性激酶等上游元素参与；
　　Ras/Raf/MEK/ERK细胞信号传递通路是由一个小GTP蛋白连接活化的受体酪氨酸激酶和胞浆蛋白组成的级联反应。
　　其活化的中心是使Ras进行鸟苷酸交换变成其活化形式Ras2GTP。
　　ERKl/2是Ras通路中重要的信号分子，位于Ras的下游，主要由生长因子受体（或蛋白质酪氨酸激酶受体）介导激活，并需要Ras,PKC和Raf蛋白参与。
　　平时ERK位于胞浆内，一旦被激活，ERK迅速穿过核膜，再激活转录因子或/和P70核蛋白体S6激酶。
　　PD98059是ERKl/2信号转导途径的抑制剂，它可以结合ERKl/2并使其失活，阻止Raf对ERKl/2的磷酸化和激活。
　　只有磷酸化的ERKl/2才具有活性。
　　由于ERK和通过磷酸化反应可调节某些转录因子的活性，如EIk2l,c2Myc,STATs,Jun,Fos,ATF2和Max等，这些转录因子进一步调节它们各自靶基因的转录，引起特定蛋白的表达或活性改变，最终调节细胞代谢和功能，影响细胞产生特定的生物学效应[4]。